Хеморезистентность колоректального рака к 5-фторурацилу связана с подавлением гена BNIP3 посредством аберрантного метилирования

Jianming He1, 2, Li Pei 1*, Heng Jiang1, Weiwen Yang1, Jianfang Chen1, Houjie Liang1

1. Department Of Oncology And Southwest Cancer Center, Southwest Hospital, Third Military Medical University, Chongqing, 400038 China;
2. Department Of Oncology, Hebei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine, Shijiazhuang 050011, China.
J Cancer 2017; 8(7):1187-1196. doi:10.7150/jca.18171

buklet pro likarski 6

buklet pro likarski 5

Цель. Исследовать корреляцию между хеморезистентностью колоректального рака к 5-фторурацилу и BNIP3 - механизмом.

Методы. Белок BNIP3 в образцах оценивали с использованием иммуногистохимии. Для количественной оценки экспрессии гена использовали полуколичественную обратную транскрипцию ПЦР и метод вестерн-блоттинга. Состояние метилирования промотора BNIP3 исследовали с помощью метилирования-специфической ПЦР. Чувствительность к лекарственным средствам анализировали с использованием МТТ-анализа.

Результаты. Проанализированы образцы 81 пациента с колоректальным раком, получавших химиотерапию препаратами на основе 5-фторурацила. Экспрессия BNIP3 была отрицательной в 42 образцах рака. Средний балл BNIP3 в пораженных опухолью тканях составил 1,8 ± 0,2, а в прилежащих участках ободочной и прямой кишки - 3,7 ± 0,5 (p <0,05). Частота ответа BNIP3 положительной группы составляла 63,6%, а ответа отрицательной группы - 36,4% (р = 0,021). Медиана PFS (выживаемость без прогрессирования) у BNIP3 положительной группы составляла 9,25 месяца, а у пациентов BNIP3 отрицательной группы - 6,5 месяцев (p = 0,011). BNIP3 мРНК не обнаруживалась в 4 из 8 колоректальных клеточных линий, и все эти 4 клеточные линии отображали только метилированный аллель BNIP3. Другие 4 клеточных линии, с экспрессией обнаруживаемого BNIP3, отображали только неметилированный аллель BNIP3 или оба аллеля (неметилированный и метилированный). 5-Aza (ингибитор метилирования ДНК) резко увеличил экспрессию BNIP3. Инактивация DNMT1 (ДНК – метилтрансферазы 1) также резко увеличила экспрессию BNIP3. Инактивация только DNMT3B не обнаружила заметного изменения экспрессии BNIP3, а блокада обоих DNMT1 и DNMT3B увеличила экспрессию BNIP3 более, чем инактивация только DNMT1. Инактивация BNIP3 снизила хемочувствительность к 5-фторурацилу, а активация BNIP3 путем деметилирования повысила хемочувствительность.

Заключение. Хеморезистентность колоректального рака к 5-фторурацилу связана с подавлением гена BNIP3 путем аберрантного метилирования через DNMT1/DNMT3B.

Заинтересовала статья?

Введен недействительный тип данных

Введен недействительный тип данных